实验原理是通过将血清脂蛋白预染后进行电泳分离。具体步骤是使用脂类染料（例如苏丹黑或油红O）对血清脂蛋白进行染色，随后将预染的血清置于琼脂糖凝胶板上进行电泳。电流通入后，脂蛋白会向正极移动，并分离出多个区带，以便于后续分析。

试剂与器材

1. 巴比缓冲液（pH 8.6，离子强度 0.075）：混合巴比/妥钠154g，巴比/妥276g，EDTA酸0.292g，加水至1000ml。
2. 三羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH 8.6）：混合三甲基氨基甲烷121.2g，EDTA酸0.29g，NaCl158.5g，加水至1000ml。
3. 琼脂糖凝胶：将0.45g琼脂糖与50ml三羟甲基氨基甲烷缓冲液和50ml水加热至沸腾，待琼脂糖完全溶解后立即停止加热。
4. 挖槽工具：为制作切口刀，可用刀片与夹板固定。挖槽小匙可用铜丝制成，端部磨平。
5. 电泳槽与电泳仪：使用与血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳相同的设备。

操作步骤

1. 预染血清：将0.2ml血清与0.2ml苏丹黑染色液混合，在37℃水浴中染色30分钟，随后离心（2000转/分钟，约5分钟）。
2. 制备琼脂糖凝胶板：将已配置的0.45%琼脂糖凝胶通过吸管浇注到载玻片上，每片25ml，静置约半小时以待凝固。
3. 点加血清：在凝固后的琼脂糖凝胶的一端2cm处切入，并取出小条凝胶。用小片滤纸吸干小槽水分，吸取约15μl预染的血清注入槽内。
4. 电泳：将凝胶板置于电泳槽中，确保样品在阴极一端。两块三层纱布先浸入巴比/妥缓冲液后贴在两端，确保其他端浸入电泳槽中的巴比/妥缓冲液。接通电源，设定电压为120-130V，电流为3-4mA，电泳15至55分钟，观察分离的色带。

注意事项

1. 使用新鲜的空腹血清为电泳样品。
2. 每块凝胶上可并行挖两个小槽，以加两个样品。
3. 可使用与小槽形状相同的有机玻璃片，在琼脂糖凝固前固定到适当位置，待凝固后再取出，留下小槽以便直接加样。
4. 若需要保存电泳样本，可将凝胶板放在清水中脱盐2小时，再在80℃的烘箱中烘干。

结果及临床意义

1. 正常人血清脂蛋白会出现三条区带，自负极向正极依次为β-脂蛋白、前β-脂蛋白和α-脂蛋白，原点无乳糜微粒。
2. 若前β-脂蛋白比α-脂蛋白深度明显，且血清甘油三酯升高可以判定为Ⅳ型高脂蛋白血症。
3. 若观察到β-脂蛋白区带明显加深，结合血清总胆固醇增高可判定为Ⅱa型；若血清总胆固醇增高而甘油三酯略升高则判定为Ⅱb型。
4. 若β-和前β-两区带相连，形成“宽β区带”，表明血清甘油三酯及胆固醇均增高，可判定为Ⅲ型。
5. 如原点出现乳糜微粒，且β、前β均呈正常或降低，且甘油三酯明显升高，判定为Ⅰ型。

注意：岑特生物所售产品仅供科研实验使用，严禁用于临床！如需了解更多信息，请访问环亚集团·AG88。