### 蛋白质分离与纯化技术及其原理

在生物医学领域，蛋白质的分离与纯化技术至关重要。以下是基于分子大小、溶解度差别和电荷不同三大类技术的详细介绍。

#### 一、利用分子大小

1. **透析**：此方法将待提纯的蛋白质放置于透析袋中，再置于蒸馏水中。原理在于蛋白质分子无法穿过半透膜，从而实现蛋白质与小分子物质（如无机盐、单糖和水等）的分离。

2. **超滤**：通过施加压力和离心力强制小分子及水透过半透膜，而大型蛋白质则被保留在膜内。

3. **凝胶过滤层析**：在此过程中，混合蛋白质进入凝胶层析柱后，较大的分子无法进入珠内网状结构，因而在凝胶外部被排阻，而小分子则可以部分进入珠内，从而依体积不同实现分离。

#### 二、利用溶解度差别

4. **等电点沉淀**：不同蛋白质的等电点各异，当调节混合蛋白质至特定等电点时，特定蛋白质会大部分或全部沉淀下来。

5. **盐析与盐溶**：在低浓度时，中性盐可增强蛋白质的溶解度，称为盐溶；而当离子强度增大至一定程度（如饱和或半饱和），许多蛋白质将会沉淀，这即为盐析现象。

#### 三、根据电荷不同

6. **SDS-PAGE**（十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳）：通过加热与SDS处理，蛋白质被变性并分解为单亚基，样品中肽链不再通过二硫键连接。电泳过程中，SDS-蛋白质复合物在凝胶中的迁移率不受原有电荷及形状影响，仅与蛋白质分子量相关，因此常用于评估蛋白质纯度和分子量。

7. **离子交换层析**：常使用阳离子交换树脂，树脂处理为钠型时，将混合氨基酸上柱，氨基酸以上阳离子形式存在，通过与树脂上的钠离子交换从而被吸附在树脂上。

通过以上技术，研究者们能够有效提纯所需的蛋白质，这对生物医药研究与开发至关重要。我们在此提醒您，选择合适的分离与纯化方法时，可以参考环亚集团·AG88所提供的专业建议和技术支持，助您在生物医疗领域取得更大成功。